苯基疏水色譜柱是苯基通過碳鏈連接鍵合于硅膠基質(zhì)上的一種色譜柱。其中,連接的碳鏈以3個碳原子較常見,也有一些采用4個或者更多的碳鏈來鍵合。這種結構使得苯基疏水色譜柱具有一定的疏水保留能力,并且為芳香化合物提供了較佳的選擇性。其主要通過固定相和溶質(zhì)之間的電子間相互作用進行分離。這種相互作用除了疏水性相互作用外,還顯示出不同于包含ODS在內(nèi)的烷基硅膠基質(zhì)固定相的分離特性。特別是對于帶有芳香環(huán)的化合物,苯環(huán)可以與芳香化合物之間形成π-π相互作用,從而提供了與C18不同的選擇性。
1、沖洗
每次使用完色譜柱后,要用適當?shù)娜軇ιV柱進行沖洗??梢韵扔脧娙軇ㄈ缫译妫_洗,去除殘留的樣品組分,然后再用弱溶劑(如水)平衡色譜柱。沖洗的時間一般為15-30分鐘,具體時間可以根據(jù)樣品的性質(zhì)和復雜程度來確定。
定期進行深度沖洗也是很有必要的??梢悦扛粢欢螘r間(如一周或一個月)使用專門的色譜柱清洗液對色譜柱進行清洗,以去除色譜柱內(nèi)部積累的雜質(zhì)和污染物。清洗液的選擇要根據(jù)色譜柱的類型和污染情況來確定,一般可以使用含有表面活性劑或螯合劑的溶液。
2、再生
當色譜柱的使用性能下降,如出現(xiàn)峰形變寬、保留時間改變或者分離度降低等情況時,可以考慮對色譜柱進行再生。再生的方法有多種,可以使用適當?shù)幕瘜W試劑進行處理。
一種常見的再生方法是使用一定比例的有機溶劑和水的混合液對色譜柱進行反向沖洗。例如,可以使用90%乙腈和10%水的混合液從色譜柱出口到入口的方向進行沖洗,這樣可以將吸附在固定相上的雜質(zhì)洗脫下來。再生后,需要用大量的水和流動相重新平衡色譜柱,使其恢復到正常的工作狀態(tài)。
3、長期保存
如果長時間不使用色譜柱,需要對其進行妥善的保存。首先,要將色譜柱從儀器上卸下,清洗干凈后,用合適的溶劑(如甲醇或乙腈)充滿色譜柱,以保持固定相的濕潤狀態(tài)。這是因為固定相在干燥的情況下可能會發(fā)生收縮或損壞。
然后將色譜柱兩端密封好,放置在陰涼、干燥的地方保存。避免陽光直射和高溫環(huán)境,防止固定相發(fā)生化學反應或變質(zhì)。