反相色譜是迄今在高效液相色譜中應(yīng)用*廣泛的技術(shù)，主要是因?yàn)樗m用于分析極大多數(shù)的非極性物質(zhì)和很多的可離子化的及離子化合物。大多數(shù)用于反相色譜的固定相本質(zhì)上都是疏水物質(zhì)，因此，分析物是按照它們與固定相的疏水相互作用的大小程度來(lái)分離的，樣品基體中其它疏水雜質(zhì)組分也能以同樣的方式保留。

　　反相色譜柱是一種常用的色譜柱產(chǎn)品，主要由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成，被廣泛用于多個(gè)領(lǐng)域中。在反相色譜柱的使用中，保持色譜柱的柱效、容量和滲透特性，延長(zhǎng)柱子的使用壽命非常重要。使用時(shí)間后就會(huì)出現(xiàn)柱壓升高、柱效降低、峰形畸變和分離度降低、保留時(shí)間改變等變化，如不采取措施，將會(huì)縮短色譜柱的使用壽命，影響工作效率，并造成一定的經(jīng)濟(jì)損失。

　　反相色譜柱在使用緩沖液的過(guò)程中還要注意以下幾點(diǎn)：

　　1、避免使用鹽酸鹽，鹽酸鹽對(duì)鋼質(zhì)有腐蝕作用；

　　2、緩沖液要現(xiàn)配現(xiàn)用，往往緩沖液是良好的菌類培養(yǎng)液，隔天或放置長(zhǎng)時(shí)間實(shí)驗(yàn)時(shí)會(huì)發(fā)生很多怪現(xiàn)象；

　　3、使用緩沖液要及時(shí)掌握pH范圍，做到胸中有數(shù)；

　　4、清洗液路和柱子時(shí)，有溫控可加熱到30攝氏度易于沖洗；

　　5、長(zhǎng)時(shí)間用緩沖溶液要注意觀察接頭處有無(wú)析出，若有白色鹽類析出，定期用10%硝酸沖洗液路可以避免液路的堵塞；

　　6、選擇緩沖液要用的試劑，避免不純的鹽類造成不必要的麻煩；